Заболевания животных

применяют для диагностики фасциолеза. В принципе это метод последовательных промываний, при котором 5 г фекалий крупного рогатого скота помещают в конусовидной формы цилиндр объемом 250 мл и диаметром в нижней части 3 см. К пробе фекалий при постоянном помешивании добавляют 200 мл водопроводной воды и отстаивают 5 минут. Промывание повторяют еще три раза, причем второй, третий и четвертый периоды отстаивания взвеси длятся соответственно 5, 4 и 3 мин. Жидкость из цилиндра отсасывают спринцовкой, оставляя на дне 0,5 см осадка, который после промывания помещают на предметное стекло (желательно градуированное на квадраты) и подсчитывают количество яиц фасциол для определения интенсивности

инвазии. При этом используют формулу:

где а – количество осадка, мл; б — количество обнаруженных яиц фасциол, шт.; в—количество взятых для исследования фекалий, мл; г — количество исследованного осадка, мл; х—число яиц фасциол в 1 мл фекалий.

 В научной и практической работе нередко приходится дифференцировать личинок гельминтов от личинок свободноживущих нематод. Для этого рекомендуется применять метод Корта, суть которого состоит в том, что берут 5 мл жидкости с личинками, помещают ее в чашку Петри и добавляют туда 1 мл 40%-ного формалина. Личинки гельминтов погибают через 15—20 минут, а личинки свободноживущих нематод — уже через 5—8 минут.

Для этой же цели можно применять метод окраски по Вайду. В пробирку помещают жидкость с личинками и добавляют 1%-ный раствор метиленового синего в соотношении 1:2 и оставляют на 15 минут. Затем пробирки помещают в центрифугу, центрифугируют, надосадочную жидкость сливают, а к осадку добавляют воду, опять центрифугируют и так повторяют 4-5 раз, пока осадок не отмоется от краски. Затем осадок помещают на предметное стекло и исследуют. Свободноживущие живые нематоды и их личинки не окрашиваются, а инвазионные живые личинки гельминтов окрашиваются интенсивно, хотя сохраняют окраску только в течение 15-20 минут. Погибшие свободноживущие нематоды и гельминты окрашиваются интенсивно и не теряют окраски.

1/16 — Кишечник личинок дифференцирован на отдельные клетки — инвазионные личинки стронгилят пищеварительного тракта, кроме личинок Вunostomum.

2/3 — Клетки кишечника расположены в один ряд. Клеток 8, форма их трапециевидная. Личинки крупные (1,2—2 мм длиной), с длинным (0,3—0,37 мм) нитевидно истончающимся хвостовым концом чехлика. Хвостовой конец тела короткий (0,5 мм) и оканчивается тремя «шипиками».

3/2 — Клетки кишечника расположены в два ряда.

4/13 — Клетки кишечника имеют форму остроконечных треугольников.

5/12 — Кишечник имеет 16 клеток.

6/7 — Хвостовой конец тела личинки оканчивается «шипиком». Пищевой сравнительно длинный и составляет около 1/4 части длины личинки. Относительно малые личинки (0,65— 0,77 мм длины). Хвостовой конец чехлика короткий (0,08— 0,1 мм). Экскреторное отверстие отстоит от кишечника на расстоянии 1/3 (и более) длины пищевода— Trichostrongylus.

7/6 — Хвостовой конец тела личинки «шипика» не имеет. Пищевод составляет лишь около 1/5 части всей длины личинки.

8/9 — Две последние клетки кишечника оканчиваются в одном пункте и на одинаковом от ануса расстоянии. Относительно малые личинки (0,7—0,8 мм длиной) с довольно длинным (0,15—0,17 мм) нитевидно оканчивающимся хвостовым концом чехлика. Пищевод относительно короткий (0,15—0,16 мм). Две последние клетки кишечника не равной длины, не треугольной, а округло-веретенообразной формы и оканчиваются в одном пункте. Экскреторный канал лежит наискось, его отверстие отстоит от кишечника более чем на 1/3 длины пищевода—Нaemonchus.

9/8 — Кишечник заканчивается одной треугольной формы клеткой.

10/11 — Хвостовой конец чехлика относительно короткий (0,12— 0,14 мм), без нитевидного истончения. Личинки крупные — 0,83—0,95 мм. Половой зачаток расположен ближе к пищеводу, чем к анусу. Экскреторное отверстие отстоит от кишечника на расстоянии менее 1/3 длины пищевода — Ostertagia.

11/10 — Хвостовой конец чехлика относительно длинный (0,16— 0,18 мм). Половой зачаток расположен ближе к анусу, чем к пищеводу. Встречаются преимущественно в фекалиях крупного рогатого скота — Соoреriа.

12/5 — Кишечник имеет 20 клеток. Личинки 0,75—0,9 мм длиной с длинным (0,23—0,28 мм) нитевидно истонченным хвостовым концом чехлика. Встречаются преимущественно в фекалиях крупного рогатого скота — Оеsорhagostomun radiatum, Oe.columbianum.

13/4 — Кишечник имеет 32 клетки формы округлых кирпичиков.

14/15 — Нитевидный хвостовой конец чехлика длинный (0,23— 0,28 мм) и составляет около 1/3 части всей длины личинки. Личинка 0,75—0,9 мм длиной, 0,024—0,029 мм шириной. Встречаются преимущественно в фекалиях овец и коз — Oe.venulosum, Oe.asperum.

15/14 — Нитевидный хвостовой конец чехлика 0,17—0,27 мм длиной и составляет около 1/4 части всей длины личинки. Личинка 0,71—0,88 мм длиной, 0,028—0,032 мм шириной— Chabertia ovina.

16/1 — Кишечник личинок не дифференцирован на отдельные клетки и представлен сплошной гомогенной зернистой массой — личинки легочных стронгилят, а также инвазионные личинки — Bunostomun, Strongyloides.

17/22 — Личинки в чехликах.

18/19 — Личинки с длинным нитевидным хвостовым концом чехлика 0,52—0,63 мм длиной, 0,020—0,23 мм шириной. Хвостовой конец чехлика нитевидный, длинный (0,13—0,17 мм). Задняя часть пищевода имеет незначительное утолщение (бульбус) —Bunostomun.

19/18 — Личинки с коротким хвостовым концом чехлика, без нитевидного образования. Инвазионные личинки  легочных стронгилят семейства Dictyocaulidae.

20/21 — На головном конце личинки пуговковидный выступ. Относительно крупные личинки — 0,5—0,56 мм длиной, 0,025 мм шириной, с коротким (0,05 мм), тупо закругленным хвостовым концом. Личинки, полученные из фекалий до 3-суточной давности, чехлика не имеют. Через 3—4 суток образуется первый чехлик, через 6 — второй. Личинки с двумя чехликами (инвазионные) значительно светлее и с более длинным пищеводом, равным около 1/3 длины личинки. Встречаются в фекалиях овец и коз —Filaria.

21/20 — Пуговкообразного выступа на головном конце нет. Мелкие личинки—0,3—0,35 мм длиной, 0,016—0,018 мм шириной. Хвостовой конец слегка заострен. Личинки, полученные из фекалий до 3-суточной давности, без чехлика, который образуется на четвертые сутки. Встречаются в фекалиях только крупного рогатого скота — Dictyocaulus viviparus.

22/17 — Личинки без чехликов.

23/24 — Личинки относительно длинные — 0,5—0,65 мм, но тонкие — 0,014—0.016 мм шириной. Хвостовой конец (0,08 мм) истончается равномерно и не имеет никаких отростков и изогнутостей. Пищевод длинный, светлый, достигает более 1/3 всей длины личинки. Филяриевидные (инвазионные) личинки —Strongyloides papillosus.

24/23 — Личинки короткие, менее 0,5 мм длиной, с наличием на хвостовом конце (обычно круто изогнутом) или отростка волнистых искривлений. Длина пищевода достигает 1/2 всей длины личинки. Личинки первой стадии легочных стронгилят семейства Рrotostrongylidae.

25/26 — Хвостовой конец личинки волнообразно изогнут, «шипика» (отростка) не имеет. Длина личинки варьирует в пределах 0,26—0,45 мм — Ргоtosrongylus.

26/25 — Хвостовой конец личинки на дорзальной стороне имеет «шип» (отросток).

27/28 — Кишечник личинок светлый, непигментированный. Граница пищевода с кишечником сглажена, почти незаметна. Длина личинок колеблется в пределах 0,27—0,318 мм—Мuellerius capillaris.

28/27 — Кишечник личинок темный, пигментированный. Граница пищевода с кишечником хорошо заметна.

29/30 — Длина личинок 0,24—0,28 мм — Вicaulus schulzi.

30/29 — Длина личинок 0,35—0,44 мм — Суstocaulus nigrescens.

Для выделения личинок стронгилят лошадей П. А. Величкин рекомендует после окончания срока культивирования пробу фекалий завернуть в марлю и поместить в стакан емкостью 200 мл с теплой (35-36°С) водой. Для предупреждения соприкосновения пробы фекалий с дном стакана туда помещают предметное стекло или металлическую сеточку. Спустя 2-3 ч пробу удаляют, верхний слой жидкости сливают, осадок помещают в чашки Петри и микроскопируют. Для лучшей дифференциации личинок их необходимо обездвиживать, для чего к осадку в чашки Петри добавляют 8-10 капель раствора Люголя. Личинки стронгилят лошадей покрыты гофрированным чехликом, имеют длинный хвостовой конец. Личинки свободноживущих нематод гофрированного чехлика лишены и у них короткие хвостовые концы. Родовую принадлежность стронгилят лошадей определяют по внутренней структуре личинок (табл. 12).

Вначале готовят искусственный желудочный сок по следующей прописи: соляной кислоты концентрированной 7 мл, пепсина 7 г, воды до 1 л. На 1 л искусственного желудочного сока берут 80—100 г фарша, который помещают в стеклянный сосуд и тщательно перемешивают. После этого стеклянный сосуд с содержимым помещают в термостат при температуре 37°С на 16—18 ч. Содержимое в сосуде периодически перемешивают с помощью магнитной (лучше — электрической) мешалки. После окончания переваривания массу из сосуда переносят в аппарат Бермана, используя сито из мельничного газа (№ 26). Через полтора-два часа все личинки трихинелл, находившиеся в пробе фарша, оседают на дно пробирки. Верхний слой жидкости в пробирке отсасывают пипеткой, а осадок микроскопируют.

состоит в том, что берут пробу свежих фекалий массой 5 г, смешивают в стакане с водой в соотношении 1 : 10, через ситечко процеживают в пробирку, центрифугируют 2 мин при скорости 1500 об/мин. Надосадочную жидкость сливают, а к осадку добавляют в равных частях глицерин и насыщенный раствор хлористого натрия. Чистой стеклянной палочкой взвесь тщательно размешивают и повторно центрифугируют. При наличии в пробе фекалий яиц гельминтов они всплывают на поверхность жидкости в центрифужной пробирке. Проволочной петлей берут 3—6 капель с поверхности взвеси, наносят на предметное стекло и микроскопируют.

 Осматривают и пальпируют кожу больного животного. При обнаружении бугорков (величиной до горошины и более) шерсть над ним выстригают и поверхность обрабатывают этиловым спиртом. Бугорок прокалывают стерильной иглой для взятия крови. Содержимое из иглы выталкивают  мандреном, помещают на предметное стекло, добавляют несколько капель воды или глицерина, препарат покрывают стеклом и микроскопируют.

 Аппарат Бермана заполняют подогретой до 42—43°С водой и в верхнюю часть воронки на металлическом сите помещают соскобы кожи. Через 40 минут содержимое трубок сливают в пробирку, центрифугируют 2 минуты при 1500 об/мин. Верхний слой жидкости сливают, а осадок микроскопируют.

используется для диагностики диктиокаулеза, мюллериоза и других нематодозов мелких жвачных. Для этой цели на часовое стекло (можно в чашку Петри) помещают 3-5 шариков фекалий и увлажняют их небольшим количеством теплой (38-40°С) воды. Через 20-30 минут фекалии удаляют, а оставшуюся жидкость микроскопируют для выявления личинок гельминтов. Метод Вайда можно успешно применять в полевых условиях для диагностики диктиокаулеза непосредственно на фермах с использованием обычных предметных стекол и дорожного микроскопа.

Для более полного сбора половозрелых и молодых форм фасциол печень разрезают по желчным протокам на крупные куски, помещают в сосуд с теплым физиологическим раствором (37-40°С). При этом большинство живых фасциол выходят из тканей и оседают на дно сосуда. После этого куски печени отжимают с целью извлечь из них оставшихся гельминтов и помещают в другую посуду. Верхний слой жидкости осторожно сливают, а осадок исследуют на наличие гельминтов.

В другом сосуде большие куски печени хорошо измельчают в воде или физрастворе и отстаивают. Более крупные кусочки печени и основная масса трематод оседают на дно, а более мелкие кусочки печени и часть молодых трематод всплывают наверх. Поэтому надосадочную жидкость фильтруют через капроновую сетку в отдельную посуду. Жидкость отстаивают, несколько раз промывают водой, верхний слой жидкости осторожно сливают, а осадок исследуют. Задержавшуюся на капроновой сетке массу промывают и рассматривают с помощью лупы. Отдельно исследуют и желчный пузырь с содержимым. Этот метод можно применять и для обнаружения дикроцелий.

Его применяют в тех случаях, когда необходимо иметь полную картину заражения гельминтами различных органов и тканей животного. Для этого вначале проводят наружный осмотр животного, затем снимают кожу. На наличие гельминтов исследуют кожу, подкожную клетчатку, различные новообразования и все иные патологические изменения. Извлеченные отдельные органы помещают в ведра, кастрюли, кюветы; спинной и головной мозг, глаза, соскобы со слизистых носовых ходов и т. д.— в отдельную посуду.

Внутренние органы изучают мокрым или сухим способом. Мокрый способ предполагает:

1. Многократное промывание водой или физиологическим раствором содержимого полостей различных органов с целью выделения гельминтов.

2.                 Исследование сливов в ряде цилиндров при изучении желудочно-кишечного тракта животных.

3.                 Компрессорное исследование соскобов с целью обнаружения находящихся в слизистой оболочке органов гельминтов.

4.                 Размозжение тканей паренхиматозных органов между стеклами.

5.                 Изучение отмытого содержимого полостей разных органов (так называемых матриксов) поочередно на белом и черном фоне.

6.                 Исследование матриксов, соскобов и размозженных тканей при помощи лупы с целью окончательной диагностики на наличие гельминтов.

Сухой способ — это раздавливание органов между стеклами до прозрачности и просмотр их под лупой без вскрытия и промывания. Им пользуются при изучении моллюсков, мелких рептилий и других организмов. В практике нередко применяют комбинацию мокрого и сухого способов.

При полном гельминтологическом вскрытии органов пищеварения их осторожно отделяют от других органов, чтобы не пролить содержимого и не повредить крупных гельминтов.

Гортань, трахею, крупные и мелкие бронхи разрезают, осматривают и исследуют соскобы со слизистых оболочек. Легкие разрезают на мелкие части и исследуют методом последовательного промывания. Сердце и крупные кровеносные сосуды вскрывают, несколько раз промывают водой и осадок изучают.

Головной и спинной мозг разрезают на мелкие кусочки, при необходимости используют лупу.

Глаза животных вскрывают и исследуют внутренние среды, а также веки, конъюнктивальный мешок с помощью метода последовательных промываний.

Пищевод вскрывают тупоконечными ножницами, осматривают внутреннюю и наружную оболочки, делают соскобы слизистой и просматривают их под лупой.

Желудок вскрывают по большой кривизне, содержимое его извлекают и помещают в отдельную посуду и изучают методом последовательных промываний. Слизистую желудка снимают и просматривают под компрессориумом или переваривают в искусственном желудочном соке для обнаружения гельминтов (оллулан и др.).

Тонкий и толстый кишечник вскрывают и исследуют отдельно. Их с содержимым помещают в посуду, несколько раз промывают и изучают осадок. Со слизистых берут соскобы и исследуют при помощи компрессориума, лупы или переваривают в искусственном желудочном соке с последующим изучением  осадка.

Желчный пузырь отделяют от печени, которую помещают в сосуд белого цвета, заливают водой и измельчают на мелкие кусочки. Затем полученную массу несколько раз промывают водой и осадок осматривают под лупой. Аналогично поступают и с поджелудочной железой. Желчный пузырь вскрывают, несколько раз промывают водой и осадок исследуют на белом фоне.

Каждую почку разрезают скальпелем, осматривают почечную лоханку, паренхиму почки раздавливают и помещают под лупу. Мочевой пузырь вскрывают, осматривают, делают соскобы со слизистой и исследуют. Мочу в отдельной посуде несколько раз промывают и осадок изучают.

Половые органы изучают с применением метода последовательных промываний измельченных тканей. Делают также соскобы и их исследуют под лупой.