Заболевания животных

 Перед проведением диагностических исследований готовят целлофановые полоски размером 8,2 см2. Их готовят из гидрофильного целлофана путем погружения в специальную смесь следующего состава: к 500 мл 6%-ного раствора карболовой кислоты добавляют 6 мл 3%-ного водного раствора малахитовой зелени и 500 мл глицерина. На 1000 целлофановых пленок расходуется 200 мл указанной смеси. Срок подготовки полосок составляет 24 ч.

Суть метода К. Като состоит в том, что на обезжиренное предметное стекло наносят 0,1 г свежих фекалий, покрывают целлофановой полоской и придавливают. Препарат микроскопируют в течение часа после приготовления, а в теплое время года через 30—40 минут. Методику К. Като можно применять для диагностики аскаридиоза, гетеракидоза и капилляриоза птиц. Эффективность ее при гельминтозах свиней ниже, чем метода флотации. Для диагностики гельминтозов жвачных ее применять нецелесообразно (Г. А. Котельников, В. М. Хренов, 1984).

Метод Столла. Он заключается в том, что в градуированный цилиндр наливают 0,56 мл раствора едкого натрия, который готовят путем добавления к 1 л воды 4 г щелочи. Затем в цилиндр вносят 4 см3
свежих фекалий и 10 стеклянных дробинок диаметром 3 мм. Цилиндр закрывают пробкой, взбалтывают в течение 2 мин, а затем сразу же отбирают 0,15 мл взвеси (в которой содержится 0,01 см3 фекалий) и помещают на предметное стекло в виде двух капель. Их покрывают стеклами и подсчитывают под микроскопом количество яиц в обеих каплях и умножают на 100. Полученное число определяет количество яиц гельминтов в 1 см3 фекалий.

состоит в том, что берут пробу фекалий массой 3 г, помещают в стаканчики емкостью 50 мл и хорошо размешивают с водой. Полученную взвесь фильтруют в стаканчик, отстаивают, сливают, а осадок в количестве 10 мл помещают в пробирки и центрифугируют 2 минуты со скоростью 1500 об/мин. После удаления надосадочной жидкости к осадку добавляют раствор аммиачной селитры, размешивают стеклянной палочкой (после каждой пробы ее надо тщательно промывать) и повторно центрифугируют в течение 2 мин при указанной скорости. После этого с поверхности жидкости пробирки металлической петлей снимают 3-6 капель взвеси, помещают их на обезжиренное предметное стекло и микроскопируют. Оставлять предметное стекло с каплями взвеси на какое-либо время не следует, так как аммиачная селитра быстро образует кристаллы, что мешает просматривать препарат.

Этот метод эффективен для диагностики аскаридатозов, трихоцефалезов, метастронгилеза, стронгилоидозов, стронгилятозов желудочно-кишечного тракта, тениидозов и эймериозов.

применяют для диагностики фасциолеза. В принципе это метод последовательных промываний, при котором 5 г фекалий крупного рогатого скота помещают в конусовидной формы цилиндр объемом 250 мл и диаметром в нижней части 3 см. К пробе фекалий при постоянном помешивании добавляют 200 мл водопроводной воды и отстаивают 5 минут. Промывание повторяют еще три раза, причем второй, третий и четвертый периоды отстаивания взвеси длятся соответственно 5, 4 и 3 мин. Жидкость из цилиндра отсасывают спринцовкой, оставляя на дне 0,5 см осадка, который после промывания помещают на предметное стекло (желательно градуированное на квадраты) и подсчитывают количество яиц фасциол для определения интенсивности

инвазии. При этом используют формулу:

где а – количество осадка, мл; б — количество обнаруженных яиц фасциол, шт.; в—количество взятых для исследования фекалий, мл; г — количество исследованного осадка, мл; х—число яиц фасциол в 1 мл фекалий.

 состоит в том, что в стаканчик емкостью 100 мл наливают 20 мл водопроводной воды и помещают туда 8—10 г фекалий овец. Если в стаканчиках свежие фекалии, их встряхивают через 5 мин, если подсохшие – через 15 минут. Вслед за этим жидкость из стаканчиков сливают в серологические пробирки, отстаивают ее в течение 2 часов, а фекалии выбрасывают. Затем жидкость из пробирок отсасывают грушей с длинным наконечником, а осадок наносят на стекло и микроскопируют. Этот метод применяют для диагностики мониезиоза овец.

применяется для диагностики фасциолеза, парамфистоматидозов, трихоцефалезов, мониезиоза и стронгилятозов желудочно-кишечного тракта.

Суть метода состоит в том, что берут 3 г фекалий крупного рогатого скота (или 1 г фекалий мелких жвачных), помещают в ступку, добавляют 45-50 мл воды и размешивают. Полученную взвесь фильтруют через металлическое или капроновое сито в мерный стакан или мензурку емкостью 100 мл. Ступку и сито прополаскивают водой и доводят объем взвеси до 100 мл, отстаивают 5 мин. Затем верхний слой осторожно сливают (или отсасывают с помощью груши) с таким расчетом, чтобы на дне стакана осталось 20 мл взвеси с осадком. Осадок аналогичным образом еще раз промывают водой, отстаивают и надосадочную жидкость сливают, оставляя в стакане 10 мл осадка с жидкостью. Для дальнейшего исследования необходимо иметь центрифужные пробирки (10 мл) с шлифованными краями. В такую пробирку наливают оставшиеся в стакане 10 мл жидкости с осадком и центрифугируют 1-2 минуты  со скоростью 1500 об/мин. Затем верхний слой жидкости сливают, а к осадку добавляют раствор сульфата цинка (ZnSO4 ·7H2O) с плотностью 1,24. Мениск жидкости должен быть выше краев центрифужной пробирки. После этого центрифужную пробирку покрывают покровным стеклом таким образом, чтобы жидкость полностью с ним соприкасалась. Затем центрифугируют в течение 0,5-1 минут со скоростью 1500 об/мин. Всплывшие при этом яйца гельминтов прилипают к покровному стеклу, которое снимают с пробирки, помещают на предметное стекло и микроскопируют.

 В научной и практической работе нередко приходится дифференцировать личинок гельминтов от личинок свободноживущих нематод. Для этого рекомендуется применять метод Корта, суть которого состоит в том, что берут 5 мл жидкости с личинками, помещают ее в чашку Петри и добавляют туда 1 мл 40%-ного формалина. Личинки гельминтов погибают через 15—20 минут, а личинки свободноживущих нематод — уже через 5—8 минут.

Для этой же цели можно применять метод окраски по Вайду. В пробирку помещают жидкость с личинками и добавляют 1%-ный раствор метиленового синего в соотношении 1:2 и оставляют на 15 минут. Затем пробирки помещают в центрифугу, центрифугируют, надосадочную жидкость сливают, а к осадку добавляют воду, опять центрифугируют и так повторяют 4-5 раз, пока осадок не отмоется от краски. Затем осадок помещают на предметное стекло и исследуют. Свободноживущие живые нематоды и их личинки не окрашиваются, а инвазионные живые личинки гельминтов окрашиваются интенсивно, хотя сохраняют окраску только в течение 15-20 минут. Погибшие свободноживущие нематоды и гельминты окрашиваются интенсивно и не теряют окраски.

 Вначале заготовляют целлофановые пленки. Для этого из гидрофильного целлофана толщиной 22 мкм нарезают прямоугольные кусочки размером 2х3 см и помещают их на 24 ч в чашку Петри, содержащую 50%-ный раствор молочной кислоты (можно глицерина). На 500 целлофановых пленок необходимо иметь 100 мл раствора молочной кислоты.

После подготовки целлофановых пленок берут пробу фекалий массой 2 г и размешивают их в стаканчике с небольшим количеством воды. Взвесь фильтруют через металлическое ситечко в другой чистый стакан емкостью 50 мл, отстаивают в течение 5 мин, сливают надосадочную жидкость, а к осадку добавляют 35-40 мл водопроводной воды, опять отстаивают 5 мин, надосадочную жидкость сливают, осадок переносят на предметное стекло и покрывают целлофановой пленкой. Через 8-10 минут проводят микроскопирование препарата. Метод применяется для диагностики фасциолеза, парамфистоматидозов, аскаридатозов, трихоцефалезов и других паразитозов животных.

 Для отлова двукрылых паразитических насекомых, спокойно сидящих на животном, применяют специально приспособленный цилиндр. Он представляет собой стеклянную трубку длиной 10 см и шириной 2,5 см. Дно цилиндра конусовидно вдавлено внутрь, на вершине имеется отверстие диаметром 5—6 см. Сверху его закрывают пробкой. Сидящее на животном насекомое накрывают цилиндром, через нижнее отверстие которого оно попадает внутрь сосуда, оттуда его забирают и помещают в морилку или садок.

Для сбора двукрылых паразитических насекомых применяют также учетный колокол (метод А. С. Мончадского и З. А. Радзивиловской). Для сбора слепней можно применять чучело-ловушку (метод К. В. Скуфьяна). Собранных насекомых обычно умерщвляют в специальных морилках. Для умерщвления насекомых применяют хлороформ. Чтобы предотвратить повреждение их в морилке, на дно ее кладут слой ваты толщиной 1—1,5 см, а поверх— полоски фильтровальной бумаги.

Умерщвленных в морилках вшей, власоедов, пухоедов, клопов, личинок двукрылых лучше всего консервировать этиловым спиртом (70°), объем которого должен быть в 50 раз больше объема насекомых. Можно применять для этих целей 4—5%-ный раствор формалина или жидкость Барбагалло (3%-ный раствор формалина на физиологическом растворе).

Консервировать насекомых можно также высушиванием их на энтомологических булавках или на ватных тампонах.

Для определения насекомых используют особенности строения их тела (табл. 15).

 применяют для диагностики фасциолеза. Для этого от крупного рогатого скота берут пробу фекалий массой 5 г (от овец – 3 г), помещают ее в стакан емкостью 200 мл, при постоянном помешивании доливают 200 мл насыщенного раствора хлористого натрия и отстаивают 20 мин. Металлической сеточкой удаляют с поверхности взвеси крупные частицы. Надосадочную жидкость сливают или отсасывают спринцовкой, оставляя на дне 25-30 мл ее. Затем оставшийся осадок размешивают стеклянной палочкой, фильтруют в чистый стакан через металлическое сито или марлю и отстаивают 5 мин. После этого надосадочную жидкость отсасывают спринцовкой, оставшиеся 15-20 мл осадка переливают в конические стаканы, отстаивают 5 минут, надосадочную жидкость сливают и осадок опять промывают. Так повторяют несколько раз, потом осадок помещают на предметное стекло и микроскопируют.

 Данный аппарат предназначен для обнаружения личинок трихинелл в свиных тушах при их переработке на мясокомбинатах. Он представляет собой термостатирующее устройство с вмонтированными в него реакторами, в которых происходит процесс переваривания групповых проб мышц в искусственном желудочном соке. Все процессы, связанные с перевариванием проб, очисткой и концентрацией личинок, механизированы и автоматизированы.

Подготовка к работе, внесение групповых проб мышц и переваривающей жидкости занимает не более 7 минут. Процесс переваривания проб мышц продолжается 20-25 минут. При наличии в пробе мышц личинок трихинелл они концентрируются в специальном приемнике. Микроскопия осадка на наличие трихинелл занимает всего 5-7 секунд.

В течение одного цикла с помощью АВТ-у можно исследовать 240 образцов мышц массой 5 г и 1200 образцов массой 1 г. Обслуживают один или несколько таких аппаратов, объединенных в линию, ветеринарный врач и лаборант. Применение аппарата АВТ-у на предприятиях увеличивает точность исследований и в 2-3 раза повышает производительность труда по сравнению с компрессорной трихинеллоскопией.

Аппарат АВТ-у изготовляется в научно-производственном объединении «Агроприбор», 117259, Москва, Б. Черемушкинская, 28, ВИГИС.