Заболевания животных

 Перед проведением диагностических исследований готовят целлофановые полоски размером 8,2 см2. Их готовят из гидрофильного целлофана путем погружения в специальную смесь следующего состава: к 500 мл 6%-ного раствора карболовой кислоты добавляют 6 мл 3%-ного водного раствора малахитовой зелени и 500 мл глицерина. На 1000 целлофановых пленок расходуется 200 мл указанной смеси. Срок подготовки полосок составляет 24 ч.

Суть метода К. Като состоит в том, что на обезжиренное предметное стекло наносят 0,1 г свежих фекалий, покрывают целлофановой полоской и придавливают. Препарат микроскопируют в течение часа после приготовления, а в теплое время года через 30—40 минут. Методику К. Като можно применять для диагностики аскаридиоза, гетеракидоза и капилляриоза птиц. Эффективность ее при гельминтозах свиней ниже, чем метода флотации. Для диагностики гельминтозов жвачных ее применять нецелесообразно (Г. А. Котельников, В. М. Хренов, 1984).

Метод Столла. Он заключается в том, что в градуированный цилиндр наливают 0,56 мл раствора едкого натрия, который готовят путем добавления к 1 л воды 4 г щелочи. Затем в цилиндр вносят 4 см3
свежих фекалий и 10 стеклянных дробинок диаметром 3 мм. Цилиндр закрывают пробкой, взбалтывают в течение 2 мин, а затем сразу же отбирают 0,15 мл взвеси (в которой содержится 0,01 см3 фекалий) и помещают на предметное стекло в виде двух капель. Их покрывают стеклами и подсчитывают под микроскопом количество яиц в обеих каплях и умножают на 100. Полученное число определяет количество яиц гельминтов в 1 см3 фекалий.

состоит в том, что берут пробу фекалий массой 3 г, помещают в стаканчики емкостью 50 мл и хорошо размешивают с водой. Полученную взвесь фильтруют в стаканчик, отстаивают, сливают, а осадок в количестве 10 мл помещают в пробирки и центрифугируют 2 минуты со скоростью 1500 об/мин. После удаления надосадочной жидкости к осадку добавляют раствор аммиачной селитры, размешивают стеклянной палочкой (после каждой пробы ее надо тщательно промывать) и повторно центрифугируют в течение 2 мин при указанной скорости. После этого с поверхности жидкости пробирки металлической петлей снимают 3-6 капель взвеси, помещают их на обезжиренное предметное стекло и микроскопируют. Оставлять предметное стекло с каплями взвеси на какое-либо время не следует, так как аммиачная селитра быстро образует кристаллы, что мешает просматривать препарат.

Этот метод эффективен для диагностики аскаридатозов, трихоцефалезов, метастронгилеза, стронгилоидозов, стронгилятозов желудочно-кишечного тракта, тениидозов и эймериозов.

применяют для диагностики фасциолеза. В принципе это метод последовательных промываний, при котором 5 г фекалий крупного рогатого скота помещают в конусовидной формы цилиндр объемом 250 мл и диаметром в нижней части 3 см. К пробе фекалий при постоянном помешивании добавляют 200 мл водопроводной воды и отстаивают 5 минут. Промывание повторяют еще три раза, причем второй, третий и четвертый периоды отстаивания взвеси длятся соответственно 5, 4 и 3 мин. Жидкость из цилиндра отсасывают спринцовкой, оставляя на дне 0,5 см осадка, который после промывания помещают на предметное стекло (желательно градуированное на квадраты) и подсчитывают количество яиц фасциол для определения интенсивности

инвазии. При этом используют формулу:

где а – количество осадка, мл; б — количество обнаруженных яиц фасциол, шт.; в—количество взятых для исследования фекалий, мл; г — количество исследованного осадка, мл; х—число яиц фасциол в 1 мл фекалий.

применяется для диагностики фасциолеза, парамфистоматидозов, трихоцефалезов, мониезиоза и стронгилятозов желудочно-кишечного тракта.

Суть метода состоит в том, что берут 3 г фекалий крупного рогатого скота (или 1 г фекалий мелких жвачных), помещают в ступку, добавляют 45-50 мл воды и размешивают. Полученную взвесь фильтруют через металлическое или капроновое сито в мерный стакан или мензурку емкостью 100 мл. Ступку и сито прополаскивают водой и доводят объем взвеси до 100 мл, отстаивают 5 мин. Затем верхний слой осторожно сливают (или отсасывают с помощью груши) с таким расчетом, чтобы на дне стакана осталось 20 мл взвеси с осадком. Осадок аналогичным образом еще раз промывают водой, отстаивают и надосадочную жидкость сливают, оставляя в стакане 10 мл осадка с жидкостью. Для дальнейшего исследования необходимо иметь центрифужные пробирки (10 мл) с шлифованными краями. В такую пробирку наливают оставшиеся в стакане 10 мл жидкости с осадком и центрифугируют 1-2 минуты  со скоростью 1500 об/мин. Затем верхний слой жидкости сливают, а к осадку добавляют раствор сульфата цинка (ZnSO4 ·7H2O) с плотностью 1,24. Мениск жидкости должен быть выше краев центрифужной пробирки. После этого центрифужную пробирку покрывают покровным стеклом таким образом, чтобы жидкость полностью с ним соприкасалась. Затем центрифугируют в течение 0,5-1 минут со скоростью 1500 об/мин. Всплывшие при этом яйца гельминтов прилипают к покровному стеклу, которое снимают с пробирки, помещают на предметное стекло и микроскопируют.

 В научной и практической работе нередко приходится дифференцировать личинок гельминтов от личинок свободноживущих нематод. Для этого рекомендуется применять метод Корта, суть которого состоит в том, что берут 5 мл жидкости с личинками, помещают ее в чашку Петри и добавляют туда 1 мл 40%-ного формалина. Личинки гельминтов погибают через 15—20 минут, а личинки свободноживущих нематод — уже через 5—8 минут.

Для этой же цели можно применять метод окраски по Вайду. В пробирку помещают жидкость с личинками и добавляют 1%-ный раствор метиленового синего в соотношении 1:2 и оставляют на 15 минут. Затем пробирки помещают в центрифугу, центрифугируют, надосадочную жидкость сливают, а к осадку добавляют воду, опять центрифугируют и так повторяют 4-5 раз, пока осадок не отмоется от краски. Затем осадок помещают на предметное стекло и исследуют. Свободноживущие живые нематоды и их личинки не окрашиваются, а инвазионные живые личинки гельминтов окрашиваются интенсивно, хотя сохраняют окраску только в течение 15-20 минут. Погибшие свободноживущие нематоды и гельминты окрашиваются интенсивно и не теряют окраски.

 Вначале заготовляют целлофановые пленки. Для этого из гидрофильного целлофана толщиной 22 мкм нарезают прямоугольные кусочки размером 2х3 см и помещают их на 24 ч в чашку Петри, содержащую 50%-ный раствор молочной кислоты (можно глицерина). На 500 целлофановых пленок необходимо иметь 100 мл раствора молочной кислоты.

После подготовки целлофановых пленок берут пробу фекалий массой 2 г и размешивают их в стаканчике с небольшим количеством воды. Взвесь фильтруют через металлическое ситечко в другой чистый стакан емкостью 50 мл, отстаивают в течение 5 мин, сливают надосадочную жидкость, а к осадку добавляют 35-40 мл водопроводной воды, опять отстаивают 5 мин, надосадочную жидкость сливают, осадок переносят на предметное стекло и покрывают целлофановой пленкой. Через 8-10 минут проводят микроскопирование препарата. Метод применяется для диагностики фасциолеза, парамфистоматидозов, аскаридатозов, трихоцефалезов и других паразитозов животных.

 применяют для диагностики фасциолеза. Для этого от крупного рогатого скота берут пробу фекалий массой 5 г (от овец – 3 г), помещают ее в стакан емкостью 200 мл, при постоянном помешивании доливают 200 мл насыщенного раствора хлористого натрия и отстаивают 20 мин. Металлической сеточкой удаляют с поверхности взвеси крупные частицы. Надосадочную жидкость сливают или отсасывают спринцовкой, оставляя на дне 25-30 мл ее. Затем оставшийся осадок размешивают стеклянной палочкой, фильтруют в чистый стакан через металлическое сито или марлю и отстаивают 5 мин. После этого надосадочную жидкость отсасывают спринцовкой, оставшиеся 15-20 мл осадка переливают в конические стаканы, отстаивают 5 минут, надосадочную жидкость сливают и осадок опять промывают. Так повторяют несколько раз, потом осадок помещают на предметное стекло и микроскопируют.

состоит в том, что 3 г свежих фекалий кладут в стаканчик (100 мл) и тщательно размешивают с водой, доводя объем до 50 мл. Полученную смесь фильтруют через металлическое или капроновое ситечко, отстаивают в течение 10 мин. Надосадочную жидкость осторожно сливают, оставляя в стакане 3—5 мл осадка и к нему добавляют опять 50— 70 мл воды, снова отстаивают и сливают надосадочную жидкость. Так повторяют несколько раз, пока надосадочная жидкость не станет прозрачной. Затем ее сливают, осадок выливают на предметное стекло (или чашку Петри) и микроскопируют.

Этим методом можно диагностировать фасциолез, парамфистоматидозы, дикроцелиоз и другие гельминтозы.

Соскоб в количестве 1 г помещают в центрифужную пробирку, заливают 10 мл 10%-ного раствора едкого калия, помешивая, подогревают до температуры 50—60 °С в течение 20 минут, а затем центрифугируют. Жидкость из пробирки сливают, а осадок переносят на предметные стекла и микроскопируют.

1/16 — Кишечник личинок дифференцирован на отдельные клетки — инвазионные личинки стронгилят пищеварительного тракта, кроме личинок Вunostomum.

2/3 — Клетки кишечника расположены в один ряд. Клеток 8, форма их трапециевидная. Личинки крупные (1,2—2 мм длиной), с длинным (0,3—0,37 мм) нитевидно истончающимся хвостовым концом чехлика. Хвостовой конец тела короткий (0,5 мм) и оканчивается тремя «шипиками».

3/2 — Клетки кишечника расположены в два ряда.

4/13 — Клетки кишечника имеют форму остроконечных треугольников.

5/12 — Кишечник имеет 16 клеток.

6/7 — Хвостовой конец тела личинки оканчивается «шипиком». Пищевой сравнительно длинный и составляет около 1/4 части длины личинки. Относительно малые личинки (0,65— 0,77 мм длины). Хвостовой конец чехлика короткий (0,08— 0,1 мм). Экскреторное отверстие отстоит от кишечника на расстоянии 1/3 (и более) длины пищевода— Trichostrongylus.

7/6 — Хвостовой конец тела личинки «шипика» не имеет. Пищевод составляет лишь около 1/5 части всей длины личинки.

8/9 — Две последние клетки кишечника оканчиваются в одном пункте и на одинаковом от ануса расстоянии. Относительно малые личинки (0,7—0,8 мм длиной) с довольно длинным (0,15—0,17 мм) нитевидно оканчивающимся хвостовым концом чехлика. Пищевод относительно короткий (0,15—0,16 мм). Две последние клетки кишечника не равной длины, не треугольной, а округло-веретенообразной формы и оканчиваются в одном пункте. Экскреторный канал лежит наискось, его отверстие отстоит от кишечника более чем на 1/3 длины пищевода—Нaemonchus.

9/8 — Кишечник заканчивается одной треугольной формы клеткой.

10/11 — Хвостовой конец чехлика относительно короткий (0,12— 0,14 мм), без нитевидного истончения. Личинки крупные — 0,83—0,95 мм. Половой зачаток расположен ближе к пищеводу, чем к анусу. Экскреторное отверстие отстоит от кишечника на расстоянии менее 1/3 длины пищевода — Ostertagia.

11/10 — Хвостовой конец чехлика относительно длинный (0,16— 0,18 мм). Половой зачаток расположен ближе к анусу, чем к пищеводу. Встречаются преимущественно в фекалиях крупного рогатого скота — Соoреriа.

12/5 — Кишечник имеет 20 клеток. Личинки 0,75—0,9 мм длиной с длинным (0,23—0,28 мм) нитевидно истонченным хвостовым концом чехлика. Встречаются преимущественно в фекалиях крупного рогатого скота — Оеsорhagostomun radiatum, Oe.columbianum.

13/4 — Кишечник имеет 32 клетки формы округлых кирпичиков.

14/15 — Нитевидный хвостовой конец чехлика длинный (0,23— 0,28 мм) и составляет около 1/3 части всей длины личинки. Личинка 0,75—0,9 мм длиной, 0,024—0,029 мм шириной. Встречаются преимущественно в фекалиях овец и коз — Oe.venulosum, Oe.asperum.

15/14 — Нитевидный хвостовой конец чехлика 0,17—0,27 мм длиной и составляет около 1/4 части всей длины личинки. Личинка 0,71—0,88 мм длиной, 0,028—0,032 мм шириной— Chabertia ovina.

16/1 — Кишечник личинок не дифференцирован на отдельные клетки и представлен сплошной гомогенной зернистой массой — личинки легочных стронгилят, а также инвазионные личинки — Bunostomun, Strongyloides.

17/22 — Личинки в чехликах.

18/19 — Личинки с длинным нитевидным хвостовым концом чехлика 0,52—0,63 мм длиной, 0,020—0,23 мм шириной. Хвостовой конец чехлика нитевидный, длинный (0,13—0,17 мм). Задняя часть пищевода имеет незначительное утолщение (бульбус) —Bunostomun.

19/18 — Личинки с коротким хвостовым концом чехлика, без нитевидного образования. Инвазионные личинки  легочных стронгилят семейства Dictyocaulidae.

20/21 — На головном конце личинки пуговковидный выступ. Относительно крупные личинки — 0,5—0,56 мм длиной, 0,025 мм шириной, с коротким (0,05 мм), тупо закругленным хвостовым концом. Личинки, полученные из фекалий до 3-суточной давности, чехлика не имеют. Через 3—4 суток образуется первый чехлик, через 6 — второй. Личинки с двумя чехликами (инвазионные) значительно светлее и с более длинным пищеводом, равным около 1/3 длины личинки. Встречаются в фекалиях овец и коз —Filaria.

21/20 — Пуговкообразного выступа на головном конце нет. Мелкие личинки—0,3—0,35 мм длиной, 0,016—0,018 мм шириной. Хвостовой конец слегка заострен. Личинки, полученные из фекалий до 3-суточной давности, без чехлика, который образуется на четвертые сутки. Встречаются в фекалиях только крупного рогатого скота — Dictyocaulus viviparus.

22/17 — Личинки без чехликов.

23/24 — Личинки относительно длинные — 0,5—0,65 мм, но тонкие — 0,014—0.016 мм шириной. Хвостовой конец (0,08 мм) истончается равномерно и не имеет никаких отростков и изогнутостей. Пищевод длинный, светлый, достигает более 1/3 всей длины личинки. Филяриевидные (инвазионные) личинки —Strongyloides papillosus.

24/23 — Личинки короткие, менее 0,5 мм длиной, с наличием на хвостовом конце (обычно круто изогнутом) или отростка волнистых искривлений. Длина пищевода достигает 1/2 всей длины личинки. Личинки первой стадии легочных стронгилят семейства Рrotostrongylidae.

25/26 — Хвостовой конец личинки волнообразно изогнут, «шипика» (отростка) не имеет. Длина личинки варьирует в пределах 0,26—0,45 мм — Ргоtosrongylus.

26/25 — Хвостовой конец личинки на дорзальной стороне имеет «шип» (отросток).

27/28 — Кишечник личинок светлый, непигментированный. Граница пищевода с кишечником сглажена, почти незаметна. Длина личинок колеблется в пределах 0,27—0,318 мм—Мuellerius capillaris.

28/27 — Кишечник личинок темный, пигментированный. Граница пищевода с кишечником хорошо заметна.

29/30 — Длина личинок 0,24—0,28 мм — Вicaulus schulzi.

30/29 — Длина личинок 0,35—0,44 мм — Суstocaulus nigrescens.

Для выделения личинок стронгилят лошадей П. А. Величкин рекомендует после окончания срока культивирования пробу фекалий завернуть в марлю и поместить в стакан емкостью 200 мл с теплой (35-36°С) водой. Для предупреждения соприкосновения пробы фекалий с дном стакана туда помещают предметное стекло или металлическую сеточку. Спустя 2-3 ч пробу удаляют, верхний слой жидкости сливают, осадок помещают в чашки Петри и микроскопируют. Для лучшей дифференциации личинок их необходимо обездвиживать, для чего к осадку в чашки Петри добавляют 8-10 капель раствора Люголя. Личинки стронгилят лошадей покрыты гофрированным чехликом, имеют длинный хвостовой конец. Личинки свободноживущих нематод гофрированного чехлика лишены и у них короткие хвостовые концы. Родовую принадлежность стронгилят лошадей определяют по внутренней структуре личинок (табл. 12).