Заболевания животных

состоит в том, что берут пробу фекалий массой 3 г, помещают в стаканчики емкостью 50 мл и хорошо размешивают с водой. Полученную взвесь фильтруют в стаканчик, отстаивают, сливают, а осадок в количестве 10 мл помещают в пробирки и центрифугируют 2 минуты со скоростью 1500 об/мин. После удаления надосадочной жидкости к осадку добавляют раствор аммиачной селитры, размешивают стеклянной палочкой (после каждой пробы ее надо тщательно промывать) и повторно центрифугируют в течение 2 мин при указанной скорости. После этого с поверхности жидкости пробирки металлической петлей снимают 3-6 капель взвеси, помещают их на обезжиренное предметное стекло и микроскопируют. Оставлять предметное стекло с каплями взвеси на какое-либо время не следует, так как аммиачная селитра быстро образует кристаллы, что мешает просматривать препарат.

Этот метод эффективен для диагностики аскаридатозов, трихоцефалезов, метастронгилеза, стронгилоидозов, стронгилятозов желудочно-кишечного тракта, тениидозов и эймериозов.

 В научной и практической работе нередко приходится дифференцировать личинок гельминтов от личинок свободноживущих нематод. Для этого рекомендуется применять метод Корта, суть которого состоит в том, что берут 5 мл жидкости с личинками, помещают ее в чашку Петри и добавляют туда 1 мл 40%-ного формалина. Личинки гельминтов погибают через 15—20 минут, а личинки свободноживущих нематод — уже через 5—8 минут.

Для этой же цели можно применять метод окраски по Вайду. В пробирку помещают жидкость с личинками и добавляют 1%-ный раствор метиленового синего в соотношении 1:2 и оставляют на 15 минут. Затем пробирки помещают в центрифугу, центрифугируют, надосадочную жидкость сливают, а к осадку добавляют воду, опять центрифугируют и так повторяют 4-5 раз, пока осадок не отмоется от краски. Затем осадок помещают на предметное стекло и исследуют. Свободноживущие живые нематоды и их личинки не окрашиваются, а инвазионные живые личинки гельминтов окрашиваются интенсивно, хотя сохраняют окраску только в течение 15-20 минут. Погибшие свободноживущие нематоды и гельминты окрашиваются интенсивно и не теряют окраски.

 Со слизистой оболочки кардиальной, фундальной и пилорической части желудка делают глубокие соскобы. Готовят искусственный желудочный сок: пепсина 3 %, соляной кислоты 2 %. Полученные соскобы желудка заливают искусственным желудочным соком в соотношении 1 : 20. Сосуд с соскобами и желудочным соком помещают в термостат при температуре 37-39°С. Массу в сосуде периодически перемешивают. Срок переваривания неконсервированного материала 28 минут, консервированного в жидкости Барбагалло – 30. После этого взвесь осаждают и осадок исследуют под микроскопом на наличие оллулан.

 Аппарат Бермана заполняют подогретой до 42—43°С водой и в верхнюю часть воронки на металлическом сите помещают соскобы кожи. Через 40 минут содержимое трубок сливают в пробирку, центрифугируют 2 минуты при 1500 об/мин. Верхний слой жидкости сливают, а осадок микроскопируют.

используется для диагностики диктиокаулеза, мюллериоза и других нематодозов мелких жвачных. Для этой цели на часовое стекло (можно в чашку Петри) помещают 3-5 шариков фекалий и увлажняют их небольшим количеством теплой (38-40°С) воды. Через 20-30 минут фекалии удаляют, а оставшуюся жидкость микроскопируют для выявления личинок гельминтов. Метод Вайда можно успешно применять в полевых условиях для диагностики диктиокаулеза непосредственно на фермах с использованием обычных предметных стекол и дорожного микроскопа.

Соскобы кожи помещают в чашку Петри и ставят в термостат при температуре 37—40°С. Через 5 минут чашку Петри из термостата вынимают и влажной кисточкой со дна собирают двигающихся клещей, помещают на предметное стекло и микроскопируют.

Метод Ф. Фюллеборна — один из наиболее распространенных методов диагностики гельминтозов. Он заключается в том, что в стакане емкостью 200 мл размешивают 8—10 г свежих фекалий животных с 20-кратным объемом насыщенного раствора хлорида натрия. После тщательного размешивания взвесь фильтруют через металлическое или капроновое ситечко (можно через марлю) в другой чистый стакан емкостью 100 мл и оставляют на 45—60 мин. Затем проволочной петлей с поверхности взвеси стакана берут 3—6 капель н наносят на хорошо обезжиренное предметное стекло, покрывают покровным стеклом и исследуют под микроскопом. После каждого исследования стаканы, стекла и стеклянные палочки моют, стекла обезжиривают, а металлические петли обжигают на пламени спиртовки или газовой горелки, что предупреждает перенос яиц паразитов из одной пробы в другую.

В связи с тем, что плотность насыщенного раствора поваренной соли составляет 1,18—1,20, этим методом выделяется только часть яиц нематод, так как плотность яиц трихоцефал составляет 1,16—1,22, неоплодотворенных яиц аскарид— 1,26.

Гельминтоовоскопия — это группа методов исследований, основанных на разнице удельной массы яиц гельминтов и жидкой среды. При использовании гельминтоовоскопии применяют флотационные или седиментационные способы, или их комбинации.

В процессе гельминтоовоскопии важным является соблюдение определенных стандартов. Считается, что на результаты исследования (независимо от его метода) влияют: величина массы пробы фекалий, время флотации или седиментации, размер ячеек фильтрационной сетки, диаметр кольца петли, форма, высота и объем стаканчиков и другие факторы (Г. А. Котельников, В. М. Хренов,1984).

В связи с этим во Всероссийском институте гельминтологии им. академика К.И. Скрябина отработаны параметры, соблюдение которых позволяет получить наиболее объективные результаты. Вот перечень некоторых из них.

1. Масса пробы фекалий при применении методов флотации, седиментации или их комбинаций должна составлять 3 г.

2. Соотношение массы фекалий к раствору должно быть 3 :50.

3. Лучшие результаты исследований получают при применении раствора аммиачной селитры (плотность 1,3)  через 10—15 мин от начала флотации.

4. Более точные результаты исследований при флотации получают с использованием стеклянных мензурок объемом 50 мл, с применением проволочной петли для снятия яиц с поверхности раствора с диаметром кольца 8—10 мм при исследовании не менее 3 капель поверхности взвеси пробы.